核酸检测，做不好这几点一切白费！

2021-02-08 14:31:35

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全球疫情舒展，国内疫情获得有效掌握，今朝我国已经进入了疫情的戍守期。新冠病毒核酸检测是新冠肺炎确诊的金尺度，但“核酸”阴性不等于没事，核酸阳性也或者是假阳性，所以不要过度神话核酸检测的究竟，若何准确应用核酸检测究竟，必需注重以下几点。

新冠病毒规范采样

新冠病毒样本采集：咽拭子规范把持

新型冠状病毒核酸混检样本采集规范把持

假阴性剖析

有些确诊病例，核酸检测究竟多次为阴性，首要原因概括为：

（1）病毒入侵人体初期，人体内病毒量尚未达到可检测的水平。采样时机和采样部位的分歧，或者导致所采集的标本中没有充沛量的病毒；

（2）任何检测试剂都有其检测下限（即敏感性），若是患者标本内的病毒达不到所使用试剂的检测下限，则会显现假阴性；

（3）实验室仪器设备机能和人员检测能力差、质量治理落实不到位等也会发生“假阴性”；

（4）采样不规范、采集部位欠妥、采集标本不典型，导致标本中被病毒传染的细胞太少或没有。即或者造成“假阴性”。可见规范采集的主要性。

（5）靶基因的降解：

一样情形下， DNA 样本不乱性较好，在室温下放置 8h 仍不影响磨练，新型冠状病毒为RNA病毒，靶基因降解对于 RNA 样品影响更为严重，因为情况中大量 RNA 酶的存在，若样品留存、运输前提欠安或存放时间过长，模板 RNA 非常轻易降解，造成假阴性。

（6）PCR 按捺物：

回转录回响和 PCR 回响均为酶促回响，任何或者按捺这些回响的物质都邑影响磨练的究竟。

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假阳性身分剖析

1、外源核酸污染：

因为 PCR 的活络度非常高，理论上一个核酸分子的污染都有或者引起究竟的假阳性，是以 PCR 标本采集最好使用无菌、无核酶的一次性器材，取材必需严厉执行无菌把持，并小心防止混入把持者或受检者的毛发、皮屑等。密封运输和留存，不克在扩增区域进行标本的采集和处理，防止 PCR 产品的污染。

只要有少的扩增产品将标本或回响管污染即可显现假阳性, PCR仪器的机能差别和温控禁绝等质量问题造成非特异性扩增也会导致假阳性现象。

若是样本采集和PCR试剂配制及回响实验过程中, 引物设计错误理, 选择的扩增列序与非目的性扩增列序具有同源性, 检测样品显现交叉污染、PCR试剂污染或PCR扩增产品污染、气溶胶污染以及实验室中克隆质粒污染都邑造成假阳性现象显现。

PCR 检测系统含有阳性内对照（内标），该内对照使用的是内源性对照，经由检测内标是否正常来监测待测样本采样、提取过程以及样本中是否有核酸按捺物，避免 PCR 假阴性。

错误格样本影响磨练究竟

我们上期也有讲到：新冠病毒核酸检测中，错误格样本若何剖断？当采样时若标本没有采集到位或采集量少少，在进行分子检测中就没有内标，无法申报定性究竟。

在新冠病毒核酸检测中，错误格样本平日是因为采样问题和采样器具问题导致的。

「有时候采集的咽拭子或鼻拭子中粘液成分过多，也会对 RT-PCR 究竟造成影响，会报为错误格样本从新采样。」

在临床中另一个对照常见的情形就是送检样本盖子没盖严或有泄露。这种情形下既会存在生物平安风险，同时发生泄露后标本或者会受到污染或含量变少不敷检测，在这种情形下也会申报错误格样本。

影响身分概括为以下几点：

起原：西安九州医学磨练

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